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JP標(biāo)準(zhǔn)品16收載的肝素鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的分析:

1、性狀

本品如含雜質(zhì)少，溶解性能就較好，配制的注射液不 易發(fā)黃。

2、鑒別

JP標(biāo)準(zhǔn)品采用HPLC法對肝素進(jìn)行鑒別。硫酸皮膚素和多硫酸軟骨素也是高度硫酸化的糖胺聚糖，與肝素結(jié)構(gòu)相似，相對分子質(zhì)量接近，很難分離。本標(biāo)準(zhǔn)采用梯度洗脫的方式，使用陰離子交換柱，填料基質(zhì)為合成聚合物顆粒，聚合物鍵合了陰離子交換基團(tuán)一-二乙基氨基乙基，硫酸皮膚素、肝素和多硫酸軟骨素都帶有強(qiáng)負(fù)電荷，但電荷上有差異，因此被依次洗脫，達(dá)到分離效果。

2.1純度檢查

2.2.1溶液的澄清度和顏色溶液的澄清度反映的是藥品溶液中的微量不溶性雜質(zhì)存在的情況，溶液的顏色反映的是有色雜質(zhì)，這些雜質(zhì)可能在藥品的生產(chǎn)過程中引入，也可能在購藏過程中產(chǎn)生，在一定程度上可反映藥品的質(zhì)量和生產(chǎn)工藝水平。日本上市的肝素鈉注射液有多個規(guī)格，為1000單位mL、250單位mL、150單位mL和10單位mL。本標(biāo)準(zhǔn)檢測溶液的潛清度和顏色時取樣品0.50g，加水20mL溶解，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定肝麥鈉的效價為110單位/mg或130單位/mg，制得溶液的濃度為2750單位/mL或3250單位/mL，約為注射液最高濃度的3倍，這更有利于控制注射液的質(zhì)量。

2.2.2 鋇

利用鋇離子與硫酸根離子生成沉淀，而藥品不干擾的特點。

2.2.3 總氮量

肝素鈉是葡糖胺和糖草酸二糖單位組成的硫酸化糖胺聚糖的鈉鹽，其中氧主要來源干葡糖胺，根據(jù)肝素鈉的結(jié)構(gòu)，氧含量不超過3%。

2.2.4蛋白質(zhì)

本品供配制注射劑用，不得含有蛋白質(zhì)。三氯乙suan可使蛋白質(zhì)變性，在酸性條件下其與蛋白質(zhì)形成不溶性鹽，且與蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的疏水基團(tuán)作用，使之暴露出來，造成蛋白質(zhì)變性，從而相互凝聚沉淀下來。

2.2.5多硫酸軟骨素

由于有機(jī)分子中各種質(zhì)子受到不同程度的屏蔽效應(yīng)，因此在核磁共振譜的不同位置上出現(xiàn)吸收峰。肝素鈉的N乙酰氨基中的甲基在82.04ppm處有信號，多硫酸軟骨素的GlcNS4S6S中的甲基在82.15ppm處有信號，以此檢測肝素鈉中的多硫酸軟骨素。

2.2.6有關(guān)物質(zhì)

與緊別項下的方法相同，檢測肝素鈉中的多硫酸軟骨素雜質(zhì)。

2.2.7 半乳糖胺

將樣品經(jīng)過水解、衍生處理，生成具有熒光吸收的物質(zhì)，通過液相色譜法，采用熒光檢測器，檢測肝素鈉中的半乳糖胺雜質(zhì)。

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